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细胞系开发解析:怎么挑选适宜的HA标签抗体?

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发表于 2024-3-23 20:13:30 | 显示全部楼层 |阅读模式

  HA标签系统运用一个HA流感血凝素,influenza hemagglutinin epitope:YPYDVPDYA)短肽肽交融到方针蛋白。HA标签可坐落蛋白质的C端或N端,该系统已广泛运用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。

  HA标签抗体能特异辨认C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的交融蛋白,细胞系开发也可以用于检测和HA tag交融表达蛋白的表达、细胞内ding位,以及纯化、定性或定量检测HA tag交融表达蛋白等。

  挑选适宜HA标签抗体需求考虑的要素

  咱们在挑选一个标签抗体时,主要依据自己试验运用上的需求。这里需求考虑的要素包含,HA抗体的运用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来源等。比方该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP试验?是否需求HRP偶联的单克隆HA标签抗体?仍是一个兔来源的HA多抗更适宜?

  一般来说,运用类型越多,在运用过程中的挑选余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体,而多克隆。另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际运用时的稀释比率。

  一个效价高的100μl HA抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,终究运用液相当于500ml),要比效价低的1ml的HA抗体(假如WB检测的稀释比率是1:200,终究运用液相当于200ml)性价比更高。因此在挑选抗体的时分,不光需求考虑抗体的量,还需求考虑抗体的效价,即不同运用的主张稀释比率。
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