金斯瑞课堂：杂交瘤抗体测序细胞传代的办法您做对了吗？

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　　经过自主研发和吞并重组不断扩展企业产品线，杂交瘤抗体测序逐渐发展为试剂的专业制造商和电子商务集成供应商，成为试剂职业发展的者。开端细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否*。
　　一：细胞与试剂方面：
　　1、细胞(单层细胞，镜检合适)
　　2、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等合适细胞有要求的培养液)
　　3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）
　　4、7.5％NaHC03溶液
　　5、0.25％胰蛋白酶
　　6、PBS洗液。
　　二：实验小用具方面：
　　1、小方瓶(100m1)
　　2、克氏瓶
　　3、胶塞
　　4、吸管(10ml、1m1）
　　5、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)
　　6、C02孵箱
　　7、超净台
　　8、倒置显微镜
　　9、4℃、-20℃冰箱
　　三：细胞传代的操作过程
　　1、选择细胞：镜检细胞，选择成长状态杰出，细胞界限明晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。
　　2、配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。
　　3、消化细胞：先用PBS洗液冲洗细胞外表1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液*覆盖细胞外表。
　　4、至细胞*脱落到胰酶中：每瓶加入10m1细胞培养液吹打涣散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。
　　5、加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片(由细胞接种浓度决定)。